New Flocculation test

As part of the validation of our procedure, we prepared a test run in which we became familiar directly with all the procedure. Although already we know this in a theoretical form, is for us important also to know it form practical and to identify the areas of greater difficulty, thus to take precautions. And we already found the first one.

The first step after collecting the sample of the culture was to flocculate it. This, as we mentioned in the flocculation test, would help us to conglomerate the algae and to discard the present water for several things, first to work with a smaller volume, second to be able to calculate the amount of hexane and isopropyl that we will use to break the cells and finally not  have interferences with substances that are present, like surpluses of the nutrients.

But this was not so easy. The flocculation process is highly affected by the acidity of the substance to be flocculate and that was the factor that we had to vary. At the time of testing firstly our cultures were in acid means, pH 5.3. At the time of making this test  the pH was on 8 affecting directly the behavior of the substance to be flocculate.

According to the Handbook book of Microalgal culture, Biotechnology and applied phycology, A. Richmong 2007; pp 217, they mention that in algae cultures with a pH from 11.8 to 12 a flocculation of  a 95% of efficiency can be given. According to this information we decided to test several times to observe the behavior of our algae on different degrees from acidity. For this we tested to pH of 12 - 8 and 5.4. This, to try to see the specific behavior of our algae at the time of being floculate. The pH of 8 is the original one from the culture without being manipulated, 12 are an adjustment with NaOH and 5,4 were fit with acetic acid. For our surprise the  culture with more acidity was the best one to be flocculate, this as much by the amount of cells suspended like by the rapidity, followed by which it was basic means. It is possible to indicate, they can appreciate and it in the image next, the cultures in the middle basic slightly changed of color becoming a little yellow, although this color is not function of amount of cells given to that the majorities of these were in the part inferior of the test tube agglomerate.

Inicialmente                                                                      Finalmente

Como parte de la validación de nuestro procedimiento, nos dimos a la tarea de llevar a cabo una corrida en la cual nos familiarizáramos directamente con el mismo. Aunque ya conocíamos el este de forma teórica, es para nosotros importante también conocerlo de forma práctica y identificar las áreas de mayor dificultad, para así tomar precauciones. Y ya encontramos la primera.

El primer paso después de colectar nuestra muestra proveniente del cultivo era flocular la misma. Esto, como mencionamos en el escrito prueba de floculación, nos ayudara a conglomerar las algas y descartar el agua presente para varias cosas, primero trabajar con un volumen menor, segundo para poder calcular la cantidad de hexano e isopropil que usaremos para romper las celular y por ultimo para no tener interferencias con sustancias que estén presentes, como remanentes de los nutrientes.

Pero esto no fue tan fácil. El proceso de floculación es altamente dependiente de la acides de la sustancia a flocular y ese fue el factor que tuvimos que variar. Al momento de hacer la primera prueba nuestros cultivos se encontraban en un medio acido, pH 5.3. Al momento de hacer esta corrida de corroboración de procedimiento el pH se encontraba sobre los 8 trastocando directamente el comportamiento de la sustancia a flocular.
Según el libro Handbook of Microalgal culture, Biotechnology and applied phycology, A. Richmong 2007 ;pp 217, ellos mencionan que en cultivos de algas con un pH de 11.8 a 12 se puede dar una floculación de hasta un 95% de eficiencia. Dado a esta información decidimos hacer varias pruebas para observar el comportamiento de nuestras algas a diferentes grados de acides. Para esto hicimos pruebas a pH de 12 - 8 y 5.4. Esto para tratar de ver el comportamiento especifico de nuestra alga al momento de ser floculada. El pH de 8 es el proveniente del cultivo sin ser manipulado, 12 es un ajuste con NaOH y 5.4 fue ajustado con acido acético. Para nuestra sorpresa el cultivo con una acides mayor fue el mejor en flocular, esto tanto por la cantidad de células suspendidas como por la rapidez, seguido por el que estaba un medio básico. Cabe señalar, y lo pueden apreciar en la imagen a continuación, los cultivos en medio básico cambiaron ligeramente de color tornándose un poco amarillos, aunque este color no es función de cantidad de células dado a que la mayorías de estas se encontraban aglomeradas en la parte inferior de la probeta.